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A endoscopia confocal a laser é um novo método de biópsia óptica em tempo real.Imagens fluorescentes de qualidade histológica podem ser obtidas instantaneamente a partir do epitélio de órgãos ocos.Atualmente, a varredura é realizada proximalmente com instrumentos baseados em sondas comumente usados ​​na prática clínica, com flexibilidade limitada no controle do foco.Demonstramos o uso de um scanner ressonante paramétrico montado na extremidade distal de um endoscópio para realizar deflexão lateral em alta velocidade.Um buraco foi gravado no centro do refletor para enrolar o caminho da luz.Este design reduz o tamanho do instrumento para 2,4 mm de diâmetro e 10 mm de comprimento, permitindo que ele seja passado através do canal de trabalho dos endoscópios médicos padrão.A lente compacta oferece resoluções lateral e axial de 1,1 e 13,6 µm, respectivamente.Uma distância de trabalho de 0 µm e um campo de visão de 250 µm × 250 µm são alcançados em taxas de quadros de até 20 Hz.A excitação a 488 nm excita a fluoresceína, um corante aprovado pela FDA para alto contraste tecidual.Os endoscópios foram reprocessados ​​durante 18 ciclos sem falhas, utilizando métodos de esterilização clinicamente aprovados.Imagens fluorescentes foram obtidas de mucosa colônica normal, adenomas tubulares, pólipos hiperplásicos, colite ulcerativa e colite de Crohn durante colonoscopia de rotina.Células únicas podem ser identificadas, incluindo colonócitos, células caliciformes e células inflamatórias.Características da mucosa, como estruturas de criptas, cavidades de criptas e lâmina própria, podem ser distinguidas.O instrumento pode ser usado como complemento à endoscopia convencional.
A endoscopia confocal a laser é uma nova modalidade de imagem que está sendo desenvolvida para uso clínico como complemento à endoscopia de rotina1,2,3.Esses instrumentos flexíveis conectados por fibra óptica podem ser usados ​​para detectar doenças nas células epiteliais que revestem órgãos ocos, como o cólon.Esta fina camada de tecido é altamente metabólicamente ativa e é a fonte de muitos processos patológicos, como câncer, infecção e inflamação.A endoscopia pode alcançar resolução subcelular, fornecendo imagens in vivo de qualidade quase histológica em tempo real para ajudar os médicos a tomar decisões clínicas.A biópsia física do tecido acarreta o risco de sangramento e perfuração.Muitas ou poucas amostras de biópsia são frequentemente coletadas.Cada amostra removida aumenta o custo cirúrgico.Demora vários dias para que a amostra seja avaliada por um patologista.Durante os dias de espera pelos resultados da patologia, os pacientes muitas vezes sentem ansiedade.Em contraste, outras modalidades de imagem clínica, como ressonância magnética, tomografia computadorizada, PET, SPECT e ultrassom, não possuem a resolução espacial e a velocidade temporal necessárias para visualizar processos epiteliais in vivo com resolução subcelular em tempo real.
Um instrumento baseado em sonda (Cellvizio) é atualmente comumente usado em clínicas para realizar “biópsia óptica”.O projeto é baseado em um feixe de fibra óptica espacialmente coerente4 que coleta e transmite imagens fluorescentes.O núcleo de fibra única atua como um “buraco” para filtrar espacialmente a luz desfocada para resolução subcelular.A varredura é realizada proximalmente usando um galvanômetro grande e volumoso.Esta disposição limita a capacidade da ferramenta de controle de foco.O estadiamento adequado do carcinoma epitelial precoce requer visualização abaixo da superfície do tecido para avaliar a invasão e determinar a terapia apropriada.A fluoresceína, um agente de contraste aprovado pela FDA, é administrada por via intravenosa para destacar características estruturais do epitélio. Esses endomicroscópios têm dimensões <2,4 mm de diâmetro e podem ser facilmente passados ​​através do canal de biópsia dos endoscópios médicos padrão. Esses endomicroscópios têm dimensões <2,4 mm de diâmetro e podem ser facilmente passados ​​através do canal de biópsia dos endoscópios médicos padrão. Este эндомикроскопы имеют размеры <2,4 mm de diâmetro e pode ser um padrão de canal padrão х медицинских эндоскопов. Esses endomicroscópios têm diâmetro <2,4 mm e podem ser facilmente passados ​​através do canal de biópsia de endoscópios médicos padrão.Esses boroscópios têm menos de 2,4 mm de diâmetro e passam facilmente pelo canal de biópsia dos boroscópios médicos padrão.Esta flexibilidade permite uma ampla gama de aplicações clínicas e é independente dos fabricantes de endoscópios.Numerosos estudos clínicos foram realizados utilizando este dispositivo de imagem, incluindo a detecção precoce de câncer de esôfago, estômago, cólon e cavidade oral.Protocolos de imagem foram desenvolvidos e a segurança do procedimento foi estabelecida.
Os sistemas microeletromecânicos (MEMS) são uma tecnologia poderosa para projetar e fabricar minúsculos mecanismos de varredura usados ​​na extremidade distal dos endoscópios.Esta posição (em relação à proximal) permite maior flexibilidade no controle da posição do foco5,6.Além da deflexão lateral, o mecanismo distal também pode realizar exames axiais, exames pós-objetivos e exames de acesso aleatório.Esses recursos permitem uma interrogação de células epiteliais mais abrangente, incluindo imagens de corte transversal vertical7, varredura livre de aberrações de grande campo de visão (FOV)8 e melhor desempenho em sub-regiões definidas pelo usuário9.MEMS resolve o sério problema de empacotar o mecanismo de varredura com o espaço limitado disponível na extremidade do instrumento.Comparados aos galvanômetros volumosos, os MEMS oferecem desempenho superior em tamanho pequeno, alta velocidade e baixo consumo de energia.Um processo de fabricação simples pode ser ampliado para produção em massa a baixo custo.Muitos designs de MEMS foram relatados anteriormente10,11,12.Nenhuma das tecnologias foi ainda suficientemente desenvolvida para permitir o uso clínico generalizado de imagens in vivo em tempo real através do canal de trabalho de um endoscópio médico.Aqui, pretendemos demonstrar o uso de um scanner MEMS na extremidade distal de um endoscópio para aquisição de imagens humanas in vivo durante endoscopia clínica de rotina.
Um instrumento de fibra óptica foi desenvolvido usando um scanner MEMS na extremidade distal para coletar imagens fluorescentes in vivo em tempo real com características histológicas semelhantes.Uma fibra monomodo (SMF) é encerrada em um tubo de polímero flexível e excitada em λex = 488 nm.Esta configuração encurta o comprimento da ponta distal e permite que ela passe para frente através do canal de trabalho dos endoscópios médicos padrão.Use a ponta para centralizar a óptica.Essas lentes são projetadas para atingir resolução axial quase difrativa com abertura numérica (NA) = 0,41 e distância de trabalho = 0 µm13.Calços de precisão são feitos para alinhar com precisão a óptica 14. O scanner é embalado em um endoscópio com ponta distal rígida de 2,4 mm de diâmetro e 10 mm de comprimento (Fig. 1a).Essas dimensões permitem sua utilização na prática clínica como acessório durante a endoscopia (fig. 1b).A potência máxima do laser incidente no tecido foi de 2 mW.
Endoscopia confocal a laser (CLE) e scanners MEMS.Fotografia mostrando (a) um instrumento embalado com dimensões de ponta distal rígida de 2,4 mm de diâmetro e 10 mm de comprimento e (b) passagem reta através do canal de trabalho de um endoscópio médico padrão (Olympus CF-HQ190L).(c) Vista frontal do scanner mostrando um refletor com abertura central de 50 µm por onde passa o feixe de excitação.O scanner é montado em um gimbal acionado por um conjunto de unidades de unidade de quadratura.A frequência ressonante do dispositivo é determinada pelo tamanho da mola de torção.(d) Vista lateral do scanner mostrando o scanner montado em um suporte com fios conectados a âncoras de eletrodo que fornecem pontos de conexão para sinais de acionamento e potência.
O mecanismo de varredura consiste em um refletor montado no gimbal acionado por um conjunto de atuadores de quadratura acionados por um pente para desviar o feixe lateralmente (plano XY) em um padrão de Lissajous (Fig. 1c).Um orifício de 50 µm de diâmetro foi gravado no centro através do qual o feixe de excitação passou.O scanner é acionado na frequência de ressonância do projeto, que pode ser ajustada alterando as dimensões da mola de torção.Âncoras de eletrodo foram gravadas na periferia do dispositivo para fornecer pontos de conexão para sinais de energia e controle (Fig. 1d).
O sistema de imagem é montado em um carrinho portátil que pode ser levado até a sala de cirurgia.A interface gráfica do usuário foi projetada para oferecer suporte a usuários com conhecimento técnico mínimo, como médicos e enfermeiros.Verifique manualmente a frequência de acionamento do scanner, o modo de forma de feixe e o FOV da imagem.
O comprimento total do endoscópio é de aproximadamente 4m para permitir a passagem completa dos instrumentos através do canal de trabalho de um endoscópio médico padrão (1,68m), com um comprimento extra para manobrabilidade.Na extremidade proximal do endoscópio, o SMF e os fios terminam em conectores que se conectam às portas de fibra óptica e com fio da estação base.A instalação contém um laser, uma unidade de filtro, um amplificador de alta tensão e um detector fotomultiplicador (PMT).O amplificador fornece energia e sinais de acionamento ao scanner.A unidade de filtro óptico acopla a excitação do laser ao SMF e passa a fluorescência ao PMT.
Os endoscópios são reprocessados ​​após cada procedimento clínico utilizando o processo de esterilização STERRAD e podem suportar até 18 ciclos sem falhas.Para a solução OPA, não foram observados sinais de danos após mais de 10 ciclos de desinfecção.Os resultados da OPA superaram os do STERRAD, sugerindo que a vida útil dos endoscópios poderia ser prolongada através da desinfecção de alto nível em vez da reesterilização.
A resolução da imagem foi determinada a partir da função de propagação de pontos usando esferas fluorescentes com diâmetro de 0,1 μm.Para resolução lateral e axial, foi medida uma largura total na metade do máximo (FWHM) de 1,1 e 13,6 µm, respectivamente (Fig. 2a, b).
Opções de imagem.A resolução lateral (a) e axial (b) da óptica de focagem é caracterizada pela função de dispersão pontual (PSF) medida utilizando microesferas fluorescentes com diâmetro de 0,1 μm.A largura total medida na metade do máximo (FWHM) foi de 1,1 e 13,6 µm, respectivamente.Inserção: São mostradas visualizações expandidas de uma única microesfera nas direções transversal (XY) e axial (XZ).(c) Imagem fluorescente obtida a partir de uma faixa alvo padrão (USAF 1951) (oval vermelha) mostrando que os grupos 7-6 podem ser claramente resolvidos.(d) Imagem de microesferas fluorescentes dispersas de 10 µm de diâmetro mostrando um campo de visão de imagem de 250 µm×250 µm.Os PSFs em (a, b) foram construídos usando MATLAB R2019a (//www.mathworks.com/).(c, d) Imagens fluorescentes foram coletadas usando LabVIEW 2021 (https://www.ni.com/).
Imagens fluorescentes de lentes de resolução padrão distinguem claramente o conjunto de colunas nos grupos 7-6, que mantém alta resolução lateral (Fig. 2c).O campo de visão (FOV) de 250 µm × 250 µm foi determinado a partir de imagens de esferas fluorescentes de 10 µm de diâmetro dispersas em lamelas (Fig. 2d).
Um método automatizado para controle de ganho de PMT e correção de fase é implementado em um sistema de imagem clínica para reduzir artefatos de movimento de endoscópios, peristaltismo do cólon e respiração do paciente.Algoritmos de reconstrução e processamento de imagens foram descritos anteriormente .O ganho do PMT é controlado por um controlador integral proporcional (PI) para evitar a saturação de intensidade .O sistema lê a intensidade máxima de pixel para cada quadro, calcula as respostas proporcionais e integrais e determina os valores de ganho do PMT para garantir que a intensidade do pixel esteja dentro da faixa permitida.
Durante a geração de imagens in vivo, a incompatibilidade de fase entre o movimento do scanner e o sinal de controle pode causar desfoque na imagem.Tais efeitos podem ocorrer devido a alterações na temperatura do dispositivo dentro do corpo humano.Imagens de luz branca mostraram que o endoscópio estava em contato com a mucosa colônica normal in vivo (Figura 3a).O desfoque de pixels desalinhados pode ser visto em imagens brutas da mucosa colônica normal (Figura 3b).Após tratamento com fase adequada e ajuste de contraste, as características subcelulares da mucosa puderam ser distinguidas (Fig. 3c).Para informações adicionais, imagens confocais brutas e imagens processadas em tempo real são mostradas na Fig. S1, e os parâmetros de reconstrução de imagem usados ​​para tempo real e pós-processamento são apresentados na Tabela S1 e Tabela S2.
Processamento de imagem.(a) Imagem endoscópica de grande angular mostrando um endoscópio (E) colocado em contato com mucosa colônica normal (N) para coletar imagens fluorescentes in vivo após administração de fluoresceína.(b) Vaguear nos eixos X e Y durante a digitalização pode fazer com que pixels desalinhados fiquem desfocados.Para fins de demonstração, uma grande mudança de fase é aplicada à imagem original.(c) Após correção da fase pós-processamento, detalhes da mucosa podem ser avaliados, incluindo estruturas de criptas (setas), com lúmen central (l) circundado pela lâmina própria (lp).Células únicas podem ser distinguidas, incluindo colonócitos (c), células caliciformes (g) e células inflamatórias (setas).Veja o vídeo adicional 1. (b, c) Imagens processadas usando LabVIEW 2021.
Imagens de fluorescência confocal foram obtidas in vivo em diversas doenças do cólon para demonstrar a ampla aplicabilidade clínica do instrumento.A imagem de grande angular é realizada primeiro usando luz branca para detectar mucosa grosseiramente anormal.O endoscópio é então avançado através do canal de trabalho do colonoscópio e colocado em contato com a mucosa.
Imagens de endoscopia de campo amplo, endomicroscopia confocal e histologia (H&E) são mostradas para neoplasia colônica, incluindo adenoma tubular e pólipo hiperplásico. Imagens de endoscopia de campo amplo, endomicroscopia confocal e histologia (H&E) são mostradas para neoplasia colônica, incluindo adenoma tubular e pólipo hiperplásico. Широкопольная эндоскопия, конфокальная эндомикроскопия e гистологические (H&E) изображения показаны для неоплазии Para obter mais informações, use o tubo de adenosina e o tubo de plástico hiperplástico. Endoscopia colônica, endomicroscopia confocal e imagens histológicas (H&E) são indicadas para neoplasia colônica, incluindo adenoma tubular e pólipo hiperplásico.显示结肠肿瘤（包括管状腺瘤和增生性息肉）的广角内窥镜检查、共聚焦显微内窥镜检查和组织学(H&E) 图像。共设计脚肠化(图像管状躰化和增生性息肉)的广角内刵霱录共共共光在微微全在圕别具和结Imagem 果学(H&E). Широкопольная эндоскопия, конфокальная микроэндоскопия e гистологические (H&E) изображения, показывающие опухоли олстой кишки, включая тубулярные аденомы e гиперпластические полипы. Endoscopia de campo amplo, microendoscopia confocal e imagens histológicas (H&E) mostrando tumores do cólon, incluindo adenomas tubulares e pólipos hiperplásicos.Os adenomas tubulares mostraram perda da arquitetura normal das criptas, redução no tamanho das células caliciformes, distorção do lúmen da cripta e espessamento da lâmina própria (fig. 4a-c).Os pólipos hiperplásicos mostraram arquitetura estrelada de criptas, poucas células caliciformes, lúmen de criptas em forma de fenda e criptas lamelares irregulares (Fig. 4d-f).
Imagem da pele espessa da mucosa in vivo. Imagens representativas de endoscopia de luz branca, endomicroscópio confocal e histologia (H&E) são mostradas para (ac) adenoma, (df) pólipo hiperplásico, (gi) colite ulcerativa e (jl) colite de Crohn. Imagens representativas de endoscopia de luz branca, endomicroscópio confocal e histologia (H&E) são mostradas para (ac) adenoma, (df) pólipo hiperplásico, (gi) colite ulcerativa e (jl) colite de Crohn. Tipos de avaliação de endoscopia na América do Norte, consultoria de pesquisa e gistologia (H&E) para (ac) еномы, (df) гиперпластического полипа, (gi) язвенного колита и (jl) колита Крона. Imagens típicas de endoscopia de luz branca, endomicroscópio confocal e histologia (H&E) são mostradas para (ac) adenoma, (df) pólipo hiperplásico, (gi) colite ulcerativa e (jl) colite de Crohn.显示了(ac) 腺瘤、(df) 增生性息肉、(gi) 溃疡性结肠炎和(jl) 克罗恩结肠炎的代表性白光内窥镜检查、共聚焦内窥镜检查和组织学( H&E) 图像。 Ele mostra(ac) 躰真、(df) 增生性息肉、(gi) 苏盖性红肠炎和(jl) 克罗恩红肠炎的体育性白光内肠肠炎性、共公司内肠肠炎性和电视学(H&E ) imagem. Представлены репрезентативные эндоскопия в белом свете, конфокальная эндоскопия и гистология (ac) аденомы, (df) plастического полипоза, (gi) язвенного колита и (jl) колита Крона (H&E). Endoscopia representativa de luz branca, endoscopia confocal e histologia de (ac) adenoma, (df) polipose hiperplásica, (gi) colite ulcerativa e (jl) colite de Crohn (H&E) são mostradas.(B) mostra imagem confocal obtida in vivo de adenoma tubular (TA) por meio de endoscópio (E).Esta lesão pré-cancerosa mostra perda da arquitetura normal da cripta (seta), distorção do lúmen da cripta (l) e apinhamento da lâmina própria da cripta (lp).Colonócitos (c), células caliciformes (g) e células inflamatórias (setas) também podem ser identificadas.Smt.Vídeo Suplementar 2. (e) mostra uma imagem confocal obtida de um pólipo hiperplásico (HP) in vivo.Esta lesão benigna demonstra uma arquitetura de cripta estrelada (seta), um lúmen de cripta em forma de fenda (l) e uma lâmina própria de formato irregular (lp).Colonócitos (c), diversas células caliciformes (g) e células inflamatórias (setas) também podem ser identificadas.Smt.O Vídeo Suplementar 3. (h) mostra imagens confocais adquiridas na colite ulcerosa (UC) in vivo.Esta condição inflamatória mostra arquitetura distorcida das criptas (seta) e células caliciformes proeminentes (g).Penas de fluoresceína (f) são expelidas das células epiteliais, refletindo o aumento da permeabilidade vascular.Numerosas células inflamatórias (setas) são vistas na lâmina própria (lp).Smt.O Vídeo Suplementar 4. (k) mostra uma imagem confocal obtida in vivo de uma região de colite de Crohn (CC).Esta condição inflamatória mostra arquitetura distorcida das criptas (seta) e células caliciformes proeminentes (g).Penas de fluoresceína (f) são expelidas das células epiteliais, refletindo o aumento da permeabilidade vascular.Numerosas células inflamatórias (setas) são vistas na lâmina própria (lp).Smt.Vídeo Suplementar 5. (b, d, h, l) Imagens processadas usando LabVIEW 2021.
Um conjunto semelhante de imagens de inflamação do cólon é mostrado, incluindo colite ulcerativa (UC) (Figura 4g-i) e colite de Crohn (Figura 4j-l).Acredita-se que a resposta inflamatória seja caracterizada por estruturas de criptas distorcidas com células caliciformes salientes.A fluoresceína é expelida das células epiteliais, refletindo o aumento da permeabilidade vascular.Um grande número de células inflamatórias pode ser observado na lâmina própria.
Demonstramos a aplicação clínica de um endoscópio laser confocal flexível acoplado a fibra que utiliza um scanner MEMS posicionado distalmente para aquisição de imagens in vivo.Na frequência ressonante, taxas de quadros de até 20 Hz podem ser alcançadas usando um modo de varredura Lissajous de alta densidade para reduzir artefatos de movimento.O caminho óptico é dobrado para proporcionar expansão do feixe e uma abertura numérica suficiente para atingir uma resolução lateral de 1,1 µm.Imagens fluorescentes de qualidade histológica foram obtidas durante colonoscopia de rotina de mucosa colônica normal, adenomas tubulares, pólipos hiperplásicos, colite ulcerativa e colite de Crohn.Células únicas podem ser identificadas, incluindo colonócitos, células caliciformes e células inflamatórias.Características da mucosa, como estruturas de criptas, cavidades de criptas e lâmina própria, podem ser distinguidas.O hardware de precisão é microusinado para garantir o alinhamento preciso dos componentes ópticos e mecânicos individuais dentro do instrumento de 2,4 mm de diâmetro x 10 mm de comprimento.O design óptico reduz o comprimento da ponta distal rígida o suficiente para permitir a passagem direta através de um canal de trabalho de tamanho padrão (3,2 mm de diâmetro) em endoscópios médicos.Portanto, independentemente do fabricante, o aparelho pode ser amplamente utilizado pelos médicos do local de residência.A excitação foi realizada em λex = 488 nm para excitar a fluoresceína, um corante aprovado pela FDA, para obter alto contraste.O instrumento foi reprocessado sem problemas durante 18 ciclos utilizando métodos de esterilização clinicamente aceitos.
Dois outros designs de instrumentos foram validados clinicamente.Cellvizio (Mauna Kea Technologies) é um endoscópio laser confocal baseado em sonda (pCLE) que usa um conjunto de cabos de fibra óptica coerentes multimodo para coletar e transmitir imagens de fluorescência1.Um espelho galvo localizado na estação base realiza uma varredura lateral na extremidade proximal.As seções ópticas são coletadas no plano horizontal (XY) com profundidade de 0 a 70 μm.Os kits de microssonda estão disponíveis de 0,91 (agulha 19 G) a 5 mm de diâmetro.Uma resolução lateral de 1 a 3,5 µm foi alcançada.As imagens foram coletadas a uma taxa de quadros de 9 a 12 Hz com um campo de visão unidimensional de 240 a 600 µm.A plataforma tem sido usada clinicamente em diversas áreas, incluindo ducto biliar, bexiga, cólon, esôfago, pulmões e pâncreas.A Optiscan Pty Ltd desenvolveu um endoscópio laser confocal baseado em endoscópio (eCLE) com um mecanismo de varredura embutido no tubo de inserção (extremidade distal) de um endoscópio profissional (EC-3870K, Pentax Precision Instruments) 17 .A seção óptica foi realizada em fibra monomodo, e a varredura lateral foi realizada em mecanismo cantilever por meio de diapasão ressonante.Um atuador de liga com memória de forma (Nitinol) é usado para criar deslocamento axial.O diâmetro total do módulo confocal é de 5 mm.Para focar, é usada uma lente GRIN com abertura numérica NA = 0,6.Imagens horizontais foram adquiridas com resoluções lateral e axial de 0,7 e 7 µm, respectivamente, a uma taxa de quadros de 0,8–1,6 Hz e um campo de visão de 500 µm × 500 µm.
Demonstramos resolução subcelular na aquisição de imagens de fluorescência in vivo do corpo humano através de um endoscópio médico usando um scanner MEMS de extremidade distal.A fluorescência fornece alto contraste de imagem, e ligantes que se ligam a alvos da superfície celular podem ser marcados com fluoróforos para fornecer identidade molecular para melhorar o diagnóstico de doenças18.Outras técnicas ópticas para microendoscopia in vivo também estão sendo desenvolvidas. A OCT utiliza o curto comprimento de coerência de uma fonte de luz de banda larga para coletar imagens no plano vertical com profundidades >1 mm19. A OCT utiliza o curto comprimento de coerência de uma fonte de luz de banda larga para coletar imagens no plano vertical com profundidades >1 mm19. ОКТ использует короткую длину когерентности широкополосного источника света для сбора изображений в вертикально Em plástico com glúbina >1 mm19. A OCT utiliza o curto comprimento de coerência de uma fonte de luz de banda larga para adquirir imagens no plano vertical com profundidade >1 mm19. OCT 使用宽带光源的短相干长度来收集垂直平面中深度> 1 mm19 的图像。1 mm19 的图像。 ОКТ использует короткую длину когерентности широкополосного источника света для сбора изображений на глубине >1 мм19 na configuração vertical. A OCT utiliza o curto comprimento de coerência de uma fonte de luz de banda larga para adquirir imagens >1 mm19 no plano vertical.No entanto, esta abordagem de baixo contraste depende da coleta de luz retroespalhada e a resolução da imagem é limitada por artefatos pontilhados.A endoscopia fotoacústica gera imagens in vivo baseadas na rápida expansão termoelástica do tecido após absorção de um pulso de laser que gera ondas sonoras20. Esta abordagem demonstrou profundidades de imagem >1 cm no cólon humano in vivo para monitorar a terapia. Esta abordagem demonstrou profundidades de imagem >1 cm no cólon humano in vivo para monitorar a terapia. Isso pode ser fornecido com uma lâmpada de exibição > 1 cm no total de cada ciclo de vida in vivo para terapia de monitoramento. Esta abordagem demonstrou uma profundidade de imagem >1 cm no cólon humano in vivo para monitoramento da terapia.这种方法已经证明在体内人结肠中成像深度> 1 厘米以监测治疗。这种方法已经证明在体内人结肠中成像深度> 1 Isso pode ser feito com uma quantidade maior de uso > 1 cm no total de cada sessão in vivo para terapia de monitoramento. Esta abordagem foi demonstrada em profundidades de imagem >1 cm no cólon humano in vivo para monitorar a terapia.O contraste é produzido principalmente pela hemoglobina na vasculatura.A endoscopia multifotônica gera imagens de fluorescência de alto contraste quando dois ou mais fótons NIR atingem biomoléculas teciduais simultaneamente21. Esta abordagem pode atingir profundidades de imagem >1 mm com baixa fototoxicidade. Esta abordagem pode atingir profundidades de imagem >1 mm com baixa fototoxicidade. Isso pode exigir uma folga maior do que 1 mm com uma foto preta. Esta abordagem pode fornecer profundidade de imagem> 1 mm com baixa fototoxicidade.这种方法可以实现>1 毫米的成像深度，光毒性低。这种方法可以实现>1 毫米的成像深度，光毒性低。 Isso pode exigir uma folga maior do que 1 mm com uma foto preta. Esta abordagem pode fornecer profundidade de imagem> 1 mm com baixa fototoxicidade.Pulsos de laser de femtosegundo de alta intensidade são necessários e este método não foi clinicamente comprovado durante a endoscopia.
Neste protótipo, o scanner realiza apenas deflexão lateral, de modo que a parte óptica fica no plano horizontal (XY).O dispositivo é capaz de operar a uma taxa de quadros mais alta (20 Hz) do que os espelhos galvânicos (12 Hz) do sistema Cellvizio.Aumente a taxa de quadros para reduzir artefatos de movimento e diminua a taxa de quadros para aumentar o sinal.Algoritmos automatizados e de alta velocidade são necessários para mitigar grandes artefatos de movimento causados ​​por movimento endoscópico, movimento respiratório e motilidade intestinal.Foi demonstrado que scanners ressonantes paramétricos alcançam deslocamentos axiais superiores a centenas de mícrons . As imagens podem ser coletadas no plano vertical (XZ), perpendicular à superfície da mucosa, para fornecer a mesma visão da histologia (H&E). As imagens podem ser coletadas no plano vertical (XZ), perpendicular à superfície da mucosa, para fornecer a mesma visão da histologia (H&E). Você pode usar a opção de configuração vertical (XZ) para obter mais informações , isso é feito também como uma fonte de informação, como um registro de história (H&E). As imagens podem ser obtidas em um plano vertical (XZ) perpendicular à superfície da mucosa para fornecer a mesma imagem da histologia (H&E).可以在垂直于粘膜表面的垂直平面(XZ) 中收集图像,以提供与组织学(H&E) 相同的视图。可以在垂直于粘膜表面的垂直平面(XZ) 中收集图像,以提供与组织学(H&E) Você pode usar a opção de configuração vertical (XZ) para obter mais informações , isso é feito também como uma opção, como um registro de registro (H&E). As imagens podem ser obtidas em um plano vertical (XZ) perpendicular à superfície da mucosa para fornecer a mesma imagem de um exame histológico (H&E).O scanner pode ser colocado em uma posição pós-objetiva onde o feixe de iluminação incide ao longo do eixo óptico principal para reduzir a sensibilidade às aberrações8.Volumes focais quase limitados por difração podem desviar-se em campos de visão arbitrariamente grandes.A varredura de acesso aleatório pode ser realizada para desviar os refletores para posições definidas pelo usuário9.O campo de visão pode ser reduzido para destacar áreas arbitrárias da imagem, melhorando a relação sinal-ruído, o contraste e a taxa de quadros.Os scanners podem ser produzidos em massa usando processos simples.Centenas de dispositivos podem ser feitos em cada wafer de silício para aumentar a produção para produção em massa de baixo custo e ampla distribuição.
O caminho óptico dobrado reduz o tamanho da ponta distal rígida, facilitando o uso do endoscópio como acessório durante a colonoscopia de rotina.Nas imagens fluorescentes mostradas, podem ser observadas características subcelulares da mucosa para distinguir adenomas tubulares (pré-cancerosos) de pólipos hiperplásicos (benignos).Esses resultados sugerem que a endoscopia pode reduzir o número de biópsias desnecessárias23.As complicações gerais associadas à cirurgia podem ser reduzidas, os intervalos de monitorização podem ser otimizados e a análise histológica de lesões menores pode ser minimizada.Também mostramos imagens in vivo de pacientes com doença inflamatória intestinal, incluindo colite ulcerativa (UC) e colite de Crohn.A colonoscopia convencional com luz branca fornece uma visão macroscópica da superfície da mucosa com capacidade limitada de avaliar com precisão a cicatrização da mucosa.A endoscopia pode ser usada in vivo para avaliar a eficácia de terapias biológicas, como anticorpos anti-TNF24.A avaliação in vivo precisa também pode reduzir ou prevenir a recorrência da doença e complicações como cirurgia e melhorar a qualidade de vida.Nenhuma reação adversa grave foi relatada em estudos clínicos associados ao uso de endoscópios contendo fluoresceína in vivo25. A potência do laser na superfície da mucosa foi limitada a <2 mW para minimizar o risco de lesão térmica e atender aos requisitos da FDA para risco não significativo26 de acordo com 21 CFR 812. A potência do laser na superfície da mucosa foi limitada a <2 mW para minimizar o risco de lesão térmica e atender aos requisitos da FDA para risco não significativo26 de acordo com 21 CFR 812. O laser mais poderoso para uma faixa de luz mais alta é de <2 meses, o que significa que o tempo de risco mínimo é ческого повреждения и соответствовать требованиям FDA относительно незначительного риска26 согласно 21 CFR 812. A potência do laser na superfície da mucosa foi limitada a <2 mW para minimizar o risco de danos térmicos e atender aos requisitos da FDA para risco insignificante26 sob 21 CFR 812.粘膜表面的激光功率限制在<2 mW，以最大限度地降低热损伤风险，并满足FDA 21 CFR 812 对非重大风险26的要求。粘膜表面的激光功率限制在<2 mW O laser mais poderoso para uma faixa de luz mais alta é de <2 meses, o que significa que o tempo de risco mínimo é ческого повреждения соответствовать требованиям FDA 21 CFR 812 относительно незначительного риска26. A potência do laser na superfície da mucosa foi limitada a <2 mW para minimizar o risco de danos térmicos e atender aos requisitos do FDA 21 CFR 812 para risco insignificante26.
O design do instrumento pode ser modificado para melhorar a qualidade da imagem.Óticas especiais estão disponíveis para reduzir a aberração esférica, melhorar a resolução da imagem e aumentar a distância de trabalho.O SIL pode ser ajustado para melhor corresponder ao índice de refração do tecido (~1,4) para melhorar o acoplamento da luz.A frequência de acionamento pode ser ajustada para aumentar o ângulo lateral do scanner e ampliar o campo de visão da imagem.Você pode usar métodos automatizados para remover quadros de uma imagem com movimento significativo para mitigar esse efeito.Um array de portas programáveis ​​em campo (FPGA) com aquisição de dados em alta velocidade será usado para fornecer correção full-frame de alto desempenho em tempo real.Para maior utilidade clínica, os métodos automatizados devem corrigir a mudança de fase e os artefatos de movimento para interpretação de imagens em tempo real.Um scanner ressonante paramétrico monolítico de 3 eixos pode ser implementado para introduzir a varredura axial 22. Esses dispositivos foram desenvolvidos para alcançar um deslocamento vertical sem precedentes> 400 µm, ajustando a frequência de acionamento em um regime que apresenta dinâmica mista de amolecimento/endurecimento27. Esses dispositivos foram desenvolvidos para alcançar um deslocamento vertical sem precedentes> 400 µm, ajustando a frequência de acionamento em um regime que apresenta dinâmica mista de amolecimento/endurecimento27. Este recurso é ideal para uma distribuição melhor do que 400 milhões de dólares стоты возбуждения в режиме, который характеризуется смешанной динамикой смягчения/жесткости27. Esses dispositivos foram projetados para atingir um deslocamento vertical sem precedentes de> 400 µm, definindo a frequência do drive em um modo caracterizado por uma dinâmica mista suave/forte27.这些设备的开发是为了通过在具有混合软化/硬化动力学的状态下调整驱动频率来实现前所未400 µm 的垂直位移27。这些 设备 的 开发 是 为了 在 具有 混合 软化 硬化 硬化 学 学 状态 下 调整 驱动频率 来 实现 的> 400 µm 的 垂直 27。 Este é um recurso que pode ser usado para entrega com uma taxa de transferência superior a 400 mkm. оты срабатывания в режиме со смешанной кинетикой размягчения/затвердевания27. Esses dispositivos foram projetados para atingir deslocamentos verticais sem precedentes> 400 µm, ajustando a frequência de disparo no modo cinético misto de amolecimento/endurecimento27.No futuro, a imagem transversal vertical poderá ajudar no estadiamento do câncer precoce (T1a).Um circuito de detecção capacitivo pode ser implementado para rastrear o movimento do scanner e corrigir a mudança de fase 28.A calibração automática de fase usando um circuito de sensor pode substituir a calibração manual do instrumento antes do uso.A confiabilidade do instrumento pode ser melhorada usando técnicas de vedação de instrumentos mais confiáveis ​​para aumentar o número de ciclos de processamento.A tecnologia MEMS promete acelerar o uso de endoscópios para visualização do epitélio de órgãos ocos, diagnóstico de doenças e monitoramento de tratamentos de forma minimamente invasiva.Com maior desenvolvimento, esta nova modalidade de imagem poderá se tornar uma solução de baixo custo para ser usada como complemento de endoscópios médicos para exame histológico imediato e poderá eventualmente substituir a análise patológica tradicional.
Simulações de traçado de raio foram realizadas usando o software de design óptico ZEMAX (versão 2013) para determinar os parâmetros da óptica de foco.Os critérios de projeto incluem resolução axial quase difrativa, distância de trabalho = 0 µm e campo de visão (FOV) maior que 250 × 250 µm2.Para excitação em comprimento de onda λex = 488 nm, foi utilizada uma fibra monomodo (SMF).Dupletos acromáticos são usados ​​para reduzir a variância da coleção de fluorescência (Figura 5a).O feixe passa pelo SMF com diâmetro de campo modal de 3,5 μm e sem truncamento passa pelo centro do refletor com diâmetro de abertura de 50 μm.Use uma lente de imersão rígida (hemisférica) com alto índice de refração (n = 2,03) para minimizar a aberração esférica do feixe incidente e garantir contato total com a superfície da mucosa.A óptica de focagem fornece um NA total = 0,41, onde NA = nsinα, n é o índice de refração do tecido, α é o ângulo máximo de convergência do feixe.As resoluções lateral e axial limitadas por difração são 0,44 e 6,65 µm, respectivamente, usando NA = 0,41, λ = 488 nm e n = 1,3313.Foram consideradas apenas lentes comercialmente disponíveis com diâmetro externo (DE) ≤ 2 mm.O caminho óptico é dobrado e o feixe que sai do SMF passa pela abertura central do scanner e é refletido de volta por um espelho fixo (0,29 mm de diâmetro).Esta configuração encurta o comprimento da extremidade distal rígida para facilitar a passagem dianteira do endoscópio através do canal de trabalho padrão (3,2 mm de diâmetro) dos endoscópios médicos.Esse recurso facilita o uso como acessório durante a endoscopia de rotina.
Guia de luz dobrado e embalagem do endoscópio.(a) O feixe de excitação sai do OBC e passa pela abertura central do scanner.O feixe é expandido e refletido de um espelho circular fixo de volta ao scanner para deflexão lateral.A óptica de focagem consiste em um par de lentes duplas acromáticas e uma lente de imersão sólida (hemisférica) que fornece contato com a superfície da mucosa.ZEMAX 2013 (https://www.zemax.com/) para design óptico e simulação de traçado de raio.(b) Mostra a localização de vários componentes do instrumento, incluindo fibra monomodo (SMF), scanner, espelhos e lentes.Solidworks 2016 (https://www.solidworks.com/) foi utilizado para modelagem 3D da embalagem do endoscópio.
Um SMF (#460HP, Thorlabs) com um diâmetro de campo de modo de 3,5 µm em um comprimento de onda de 488 nm foi usado como um “buraco” para filtragem espacial de luz desfocada (Fig. 5b).Os SMFs são envoltos em tubos flexíveis de polímero (#Pebax 72D, Nordson MEDICAL).Um comprimento de aproximadamente 4 metros é usado para garantir distância suficiente entre o paciente e o sistema de imagem.Um par de lentes duplas acromáticas revestidas com MgF2 de 2 mm (# 65568, # 65567, Edmund Optics) e uma lente hemisférica não revestida de 2 mm (# 90858, Edmund Optics) foram usadas para focar o feixe e coletar a fluorescência.Insira um tubo final de aço inoxidável (4 mm de comprimento, 2,0 mm de diâmetro externo, 1,6 mm de diâmetro interno) entre a resina e o tubo externo para isolar a vibração do scanner.Use adesivos médicos para proteger o instrumento de fluidos corporais e procedimentos de manuseio.Use tubo termorretrátil para proteger os conectores.
O scanner compacto é feito segundo o princípio da ressonância paramétrica.Grave uma abertura de 50 μm no centro do refletor para transmitir o feixe de excitação.Usando um conjunto de unidades acionadas por pente de quadratura, o feixe expandido é desviado transversalmente na direção ortogonal (plano XY) no modo Lissajous.Uma placa de aquisição de dados (#DAQ PCI-6115, NI) foi usada para gerar sinais analógicos para controlar o scanner.A energia foi fornecida por um amplificador de alta tensão (#PDm200, PiezoDrive) através de fios finos (#B4421241, MWS Wire Industries).Faça a fiação na armadura do eletrodo.O scanner opera em frequências próximas a 15 kHz (eixo rápido) e 4 kHz (eixo lento) para atingir FOV de até 250 µm × 250 µm.O vídeo pode ser gravado a uma taxa de quadros de 10, 16 ou 20 Hz.Essas taxas de quadros são usadas para corresponder à taxa de repetição do padrão de varredura de Lissajous, que depende do valor das frequências de excitação X e Y do scanner .Detalhes das compensações entre taxa de quadros, resolução de pixels e densidade do padrão de varredura são apresentados em nosso trabalho anterior .
Um laser de estado sólido (#OBIS 488 LS, coerente) fornece λex = 488 nm para excitar a fluoresceína para contraste de imagem (Fig. 6a).As tranças ópticas são conectadas à unidade de filtro através de conectores FC/APC (perda de 1,82 dB) (Fig. 6b).O feixe é desviado por um espelho dicróico (#WDM-12P-111-488/500:600, Oz Optics) no SMF através de outro conector FC/APC.De acordo com 21 CFR 812, a potência incidente no tecido é limitada a um máximo de 2 mW para atender aos requisitos da FDA para risco insignificante.A fluorescência foi passada através de um espelho dicróico e um filtro de transmissão longo (#BLP01-488R, Semrock).A fluorescência foi transmitida a um detector de tubo fotomultiplicador (PMT) (#H7422-40, Hamamatsu) através de um conector FC/PC usando uma fibra multimodo de ~1 m de comprimento com um diâmetro de núcleo de 50 µm.Os sinais fluorescentes foram amplificados com um amplificador de corrente de alta velocidade (#59-179, Edmund Optics).Software especial (LabVIEW 2021, NI) foi desenvolvido para aquisição de dados e processamento de imagens em tempo real.As configurações de potência do laser e ganho PMT são determinadas pelo microcontrolador (#Arduino UNO, Arduino) usando uma placa de circuito impresso especial.O SMF e os fios terminam em conectores e se conectam às portas de fibra óptica (F) e com fio (W) na estação base (Figura 6c).O sistema de imagem está contido em um carrinho portátil (Figura 6d). Um transformador de isolamento foi usado para limitar a corrente de fuga a <500 μA. Um transformador de isolamento foi usado para limitar a corrente de fuga a <500 μA. Para a organização, você precisa de um transformador isolado <500 mкА. Um transformador de isolamento foi usado para limitar a corrente de fuga a <500 µA.使用隔离变压器将泄漏电流限制在<500 μA。 <500 μA。 Use o transformador isolado, o que significa que você pode usar até <500 mкА. Use um transformador de isolamento para limitar a corrente de fuga a <500 µA.
sistema de visualização.(a) O PMT, o laser e o amplificador estão na estação base.(b) No banco de filtros, o laser (azul) passa pelo cabo de fibra óptica através do conector FC/APC.O feixe é desviado por um espelho dicróico (DM) em uma fibra monomodo (SMF) através de um segundo conector FC/APC.A fluorescência (verde) viaja através do DM e do filtro passa-longo (LPF) até o PMT via fibra multimodo (MMF).(c) A extremidade proximal do endoscópio está conectada às portas de fibra óptica (F) e com fio (W) da estação base.(d) Endoscópio, monitor, estação base, computador e transformador de isolamento em um carrinho portátil.(a, c) Solidworks 2016 foi utilizado para modelagem 3D do sistema de imagem e componentes do endoscópio.
A resolução lateral e axial da óptica de focagem foi medida a partir da função de dispersão pontual de microesferas fluorescentes (#F8803, Thermo Fisher Scientific) com 0,1 µm de diâmetro.Colete imagens traduzindo as microesferas horizontalmente e verticalmente em passos de 1 μm usando um estágio linear (# M-562-XYZ, DM-13, Newport).Pilha de imagens usando ImageJ2 para adquirir imagens transversais de microesferas.
Software especial (LabVIEW 2021, NI) foi desenvolvido para aquisição de dados e processamento de imagens em tempo real.Na fig.7 mostra uma visão geral das rotinas utilizadas para operar o sistema.A interface do usuário consiste em aquisição de dados (DAQ), painel principal e painel controlador.O painel de coleta de dados interage com o painel principal para coletar e armazenar dados brutos, fornecer entrada para configurações personalizadas de coleta de dados e gerenciar configurações do driver do scanner.O painel principal permite ao usuário selecionar a configuração desejada para utilização do endoscópio, incluindo o sinal de controle do scanner, taxa de quadros de vídeo e parâmetros de aquisição.Este painel também permite ao usuário exibir e controlar o brilho e o contraste da imagem.Usando os dados brutos como entrada, o algoritmo calcula a configuração de ganho ideal para o PMT e ajusta automaticamente esse parâmetro usando um sistema de controle de feedback integral proporcional (PI)16.A placa controladora interage com a placa principal e a placa de aquisição de dados para controlar a potência do laser e o ganho do PMT.
Arquitetura de software do sistema.A interface do usuário consiste em módulos (1) aquisição de dados (DAQ), (2) painel principal e (3) painel controlador.Esses programas são executados simultaneamente e se comunicam entre si por meio de filas de mensagens.A chave é MEMS: Sistema Microeletromecânico, TDMS: Fluxo de Controle de Dados Técnicos, PI: Integral Proporcional, PMT: Fotomultiplicador.Os arquivos de imagem e vídeo são salvos nos formatos BMP e AVI, respectivamente.
Um algoritmo de correção de fase é usado para calcular a dispersão das intensidades dos pixels da imagem em diferentes valores de fase para determinar o valor máximo usado para tornar a imagem mais nítida.Para correção em tempo real, a faixa de varredura de fase é de ±2,86° com um passo relativamente grande de 0,286° para reduzir o tempo de cálculo.Além disso, usar partes da imagem com menos amostras reduz ainda mais o tempo de cálculo do quadro da imagem de 7,5 segundos (1 Mamostra) para 1,88 segundos (250 Kamostra) a 10 Hz.Esses parâmetros de entrada foram escolhidos para fornecer qualidade de imagem adequada com latência mínima durante imagens in vivo.Imagens e vídeos ao vivo são gravados nos formatos BMP e AVI, respectivamente.Os dados brutos são armazenados no formato de fluxo de gerenciamento de dados técnicos (TMDS).
Pós-processamento de imagens in vivo para melhoria de qualidade com LabVIEW 2021. A precisão é limitada ao usar algoritmos de correção de fase durante imagens in vivo devido ao longo tempo de computação necessário.Apenas áreas de imagem e números de amostra limitados são usados.Além disso, o algoritmo não funciona bem para imagens com artefatos de movimento ou baixo contraste e leva a erros de cálculo de fase30.Quadros individuais com alto contraste e sem artefatos de movimento foram selecionados manualmente para ajuste fino de fase com uma faixa de varredura de fase de ±0,75° em passos de 0,01°.Toda a área da imagem foi utilizada (por exemplo, 1 Mamostra de uma imagem gravada em 10 Hz).A Tabela S2 detalha os parâmetros de imagem usados ​​para tempo real e pós-processamento.Após a correção de fase, um filtro mediano é usado para reduzir ainda mais o ruído da imagem.O brilho e o contraste são melhorados ainda mais pelo alongamento do histograma e pela correção gama31.
Os ensaios clínicos foram aprovados pelo Conselho de Revisão das Instituições Médicas de Michigan e foram conduzidos no Departamento de Procedimentos Médicos.Este estudo está registrado online em ClinicalTrials.gov (NCT03220711, data de registro: 18/07/2017).Os critérios de inclusão incluíram pacientes (com idade entre 18 e 100 anos) com colonoscopia eletiva previamente planejada, risco aumentado de câncer colorretal e histórico de doença inflamatória intestinal.O consentimento informado foi obtido de cada sujeito que concordou em participar.Os critérios de exclusão foram pacientes grávidas, com hipersensibilidade conhecida à fluoresceína ou em quimioterapia ativa ou radioterapia.Este estudo incluiu pacientes consecutivos agendados para colonoscopia de rotina e foi representativo da população do Michigan Medical Center.O estudo foi conduzido de acordo com a Declaração de Helsinque.
Antes da cirurgia, calibre o endoscópio usando esferas fluorescentes de 10 μm (#F8836, Thermo Fisher Scientific) montadas em moldes de silicone.Um selante de silicone translúcido (#RTV108, Momentive) foi derramado em um molde plástico de 8 cm3 impresso em 3D.Deixe cair as contas fluorescentes de água sobre o silicone e deixe até que o meio aquático seque.
Todo o cólon foi examinado utilizando um colonoscópio médico padrão (Olympus, CF-HQ190L) com iluminação de luz branca.Após o endoscopista determinar a área da suposta doença, a área é lavada com 5 a 10 ml de ácido acético a 5% e depois com água estéril para remover muco e detritos.Uma dose de 5 ml de fluoresceína 5 mg/ml (Alcon, Fluorescite) foi injetada por via intravenosa ou pulverizada topicamente na mucosa usando uma cânula padrão (M00530860, Boston Scientific) que foi passada através do canal de trabalho.
Use um irrigador para remover o excesso de corante ou detritos da superfície da mucosa.Remova o cateter nebulizador e passe o endoscópio pelo canal de trabalho para obter imagens ante-mortem.Utilize orientação endoscópica de campo amplo para posicionar a ponta distal na área alvo. O tempo total utilizado para coletar imagens confocal foi <10 min. O tempo total utilizado para coletar imagens confocal foi <10 min. Durante o período de tempo, libere a configuração da configuração, definindo <10 minutos. O tempo total necessário para coletar imagens confocal foi <10 min.O tempo total de aquisição para imagens confocal foi inferior a 10 minutos.O vídeo endoscópico de luz branca foi processado usando o sistema de imagem Olympus EVIS EXERA III (CLV-190) e gravado usando um gravador de vídeo Elgato HD.Use o LabVIEW 2021 para gravar e salvar vídeos de endoscopia.Após a conclusão da imagem, o endoscópio é removido e o tecido a ser visualizado é excisado usando uma pinça de biópsia ou uma alça. Os tecidos foram processados ​​para histologia de rotina (H&E) e avaliados por um patologista GI especialista (HDA). Os tecidos foram processados ​​para histologia de rotina (H&E) e avaliados por um patologista GI especialista (HDA). Ткани были обработаны para обычной гистологии (H&E) e оценены экспертом-патологом желудочно-кишечного тракта (HD A). Os tecidos foram processados ​​para histologia de rotina (H&E) e avaliados por um patologista gastrointestinal especialista (HDA).对组织进行常规组织学(H&E) 处理，并由专家GI 病理学家(HDA) 进行评估。对组织进行常规组织学(H&E) 处理，并由专家GI 病理学家(HDA) 进行评估。 Ткани были обработаны para обычной гистологии (H&E) e оценены экспертом-патологом желудочно-кишечного тракта (HD A). Os tecidos foram processados ​​para histologia de rotina (H&E) e avaliados por um patologista gastrointestinal especialista (HDA).As propriedades espectrais da fluoresceína foram confirmadas usando um espectrômetro (USB2000 +, Ocean Optics) como mostrado na Figura S2.
Os endoscópios são esterilizados após cada utilização por seres humanos (Fig. 8).Os procedimentos de limpeza foram realizados sob a direção e aprovação do Departamento de Controle de Infecções e Epidemiologia do Michigan Medical Center e da Unidade Central de Processamento de Estéril. Antes do estudo, os instrumentos foram testados e validados para esterilização pela Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson), uma entidade comercial que fornece serviços de prevenção de infecções e validação de esterilização. Antes do estudo, os instrumentos foram testados e validados para esterilização pela Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson), uma entidade comercial que fornece serviços de prevenção de infecções e validação de esterilização. Como usar instrumentos de proteção e desinfecção para produtos de esterilização avançados da empresa (ASP, Johnson & Johnson), comercial организацией, distribua o uso de informações de perfil e esterilize. Antes do estudo, os instrumentos foram testados e aprovados para esterilização pela Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson), uma organização comercial que fornece serviços de prevenção de infecções e verificação de esterilização. Para obter ferramentas de esterilização e produtos avançados de esterilização (ASP, Johnson & Johnson), organização comercial, aqui use o uso de proteção contra infecção de perfil e esterilize-o. Os instrumentos foram esterilizados e inspecionados antes do estudo pela Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson), uma organização comercial que fornece serviços de prevenção de infecções e verificação de esterilização.
Reciclagem de ferramentas.(a) Os endoscópios são colocados em bandejas após cada esterilização usando o processo de processamento STERRAD.(b) O SMF e os fios são terminados com conectores de fibra óptica e elétricos, respectivamente, que são fechados antes do reprocessamento.
Limpe os endoscópios fazendo o seguinte: (1) limpe o endoscópio com um pano sem fiapos embebido em limpador enzimático, de proximal para distal;(2) Mergulhe o instrumento na solução de detergente enzimático por 3 minutos com água.tecido sem fiapos.Os conectores elétricos e de fibra óptica são cobertos e removidos da solução;(3) O endoscópio é embrulhado e colocado na bandeja de instrumentos para esterilização usando STERRAD 100NX, gás plasma de peróxido de hidrogênio.temperatura relativamente baixa e ambiente de baixa umidade.
Os conjuntos de dados utilizados e/ou analisados ​​no presente estudo estão disponíveis aos respectivos autores mediante solicitação razoável.
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